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人P21蛋白(P21)ELISA试剂盒使用说明书
产品名称:人P21蛋白(P21)定量检测试剂盒(ELISA)
用途:定量检测人血清、血浆及相关液体样本中P21蛋白的含量。
检测原理:采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA),通过标准品和样本的OD值计算P21蛋白浓度。
试剂盒组成
组分 规格(48T) 规格(96T)
预包被酶标板 8×6条8×12条
标准品(6管 )0.3ml/管0.3ml/管
20倍浓缩洗涤液 25ml50ml
样本稀释液 6ml12ml
酶标试剂 6ml12ml
显色剂A/B液各 3ml各6ml
终止液 6ml12ml
实验步骤
样本准备
血清/血浆:使用无热原试管收集,避免溶血,2-8℃保存48小时或-20℃长期保存。
组织匀浆:离心去除悬浮物,稀释至检测范围内。
试剂配制
洗涤液:蒸馏水1:20稀释浓缩液(如1ml浓缩液+19ml蒸馏水)。
标准品:按梯度稀释(48/24/12/6/3/1.5 ng/L) 。
加样与孵育
标准品孔:加入50μl标准品;样本孔:10μl样本+40μl稀释液(5倍稀释) 。
37℃避光孵育30分钟,洗涤4次。
显色与检测
加入酶标工作液,37℃孵育30分钟,洗涤后加TMB显色液,避光孵育15分钟。
加入终止液,立即测定OD450值。
注意事项
试剂盒仅限科研使用。
避免反复冻融样本,洗涤时需拍干残留液滴。
标准品需现配现用,显色后需立即终止反应。
数据计算
根据标准品OD值绘制标准曲线,样本浓度通过线性回归方程计算。
检测范围:1.5-48 ng/L^^1^^。
灵敏度:<0.5 ng/mL(超灵敏试剂盒) 。
附录
P21蛋白功能:细胞周期调控因子,与肿瘤yizhi和DNA修复相关。
相关产品:PAK4重组蛋白(货号BES4007K)可用于对照实验。
注:以上资料仅供参考,具体产品信息请咨询技术老师或品牌供应商。
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