大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒的实验原理

　　基于双抗体夹心法酶联免疫吸附测定(ELISA)技术，具体流程如下：

　　固相抗体包被‌

　　微孔板预先包被抗VEGF-C单克隆抗体，形成固相捕获抗体‌。

　　抗原-抗体结合‌

　　加入待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)，样本中的VEGF-C与固相抗体特异性结合，形成“固相抗体-VEGF-C"复合物‌。

　　酶标抗体反应‌

　　加入生物素标记的抗VEGF-C多克隆抗体(检测抗体)，与已结合的VEGF-C结合，形成“固相抗体-VEGF-C-酶标抗体"夹心结构‌。

　　信号检测‌

　　洗涤去除未结合物质后，加入过氧化物酶标记的亲和素(链霉亲和素-HRP)‌。

　　加入底物TMB(四甲基联苯胺)，HRP催化TMB显色(蓝色→黄色)，颜色深浅与VEGF-C浓度成正比‌。

　　酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样本浓度‌。

　　关键特性‌：

　　检测范围通常为15.6–1000pg/ml‌。

　　特异性针对VEGF-C亚型(，避免与其他VEGF家族成员交叉反应‌。

　　适用于科研实验

　　注意事项‌：

　　样本需避免反复冻融，血清/血浆样本需使用无热原试管收集‌。

　　实验重复性要求板内变异系数<10%，板间<15%‌。

　　注：仅供科研使用，以上资料供参考，如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

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