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大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒的实验原理
BS-3017 大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒
基于双抗体夹心法,其核心流程与VEGF家族其他成员(如VEGF-A)的检测方法类似,具体步骤如下:
实验原理详解
抗体包被
微孔板预先包被抗VEGF-B的特异性捕获抗体,形成固相抗体层,用于结合样本中的目标抗原。
抗原-抗体结合
样本(如血清、组织匀浆)与标准品加入孔中,VEGF-B与捕获抗体结合,形成“固相抗体-抗原"复合物。
酶标抗体反应
加入生物素标记的检测抗体(或HRP标记的二抗),与抗原的另一表位结合,形成“捕获抗体-抗原-酶标抗体"夹心结构。
显色与定量
加入TMB底物后,酶催化反应产生蓝色产物,终止后变为黄色。通过酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值),其强度与VEGF-B浓度呈正相关。
关键特点
特异性:双抗体设计确保对VEGF-B的高特异性,避免与其他VEGF家族成员交叉反应。
灵敏度:检测范围通常为31.2–2000pg/mL,适用于低浓度样本分析。
样本兼容性:支持血清、血浆等样本类型,需注意抗凝剂选择(如EDTA)以避免干扰。
注意事项
实验需严格控制孵育时间(通常37℃ 60分钟)和洗涤次数,以减少背景信号。
显色反应需避光操作,终止后30分钟内完成检测以保证数据稳定性。
如需进一步了解VEGF-B的生物学功能或实验优化细节,可参考相关文献或试剂盒说明书。
注:仅供科研使用,以上资料供参考,如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。
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