大鼠白介素12(IL-12P70)ELISA试剂盒的实验原理基于‌双抗体夹心法‌，通过特异性抗体捕获目标蛋白并放大信号，最终实现定量检测。以下是详细解析：

　　1. ‌核心原理‌

　　双抗体夹心‌：试剂盒采用两种高亲和力抗体，分别针对IL-12P70的不同表位。

　　包被抗体‌：预包被在酶标板上的抗大鼠IL-12单抗，捕获样本中的IL-12P70‌。

　　检测抗体‌：生物素标记的抗IL-12抗体，与已结合的IL-12P70形成“夹心"复合物‌。

　　信号放大‌：通过辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)与生物素结合，催化底物显色(TMB)，显色强度与IL-12P70浓度成正比‌。

　　2. ‌实验流程‌

　　样本孵育‌：标准品或待测样本与包被抗体反应，特异性结合IL-12P70‌。

　　洗涤‌：去除未结合物质，减少背景干扰‌。

　　检测抗体孵育‌：生物素化抗体与IL-12P70结合，形成复合物‌。

　　酶标记物反应‌：HRP-链霉亲和素与生物素结合，催化TMB显色‌。

　　终止与检测‌：加入终止液后，在450nm波长测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算浓度‌。

　　3. ‌技术特点‌

　　高特异性‌：抗体仅识别IL-12P70(p35/p40异源二聚体)，避免与其他亚型(如p40同源二聚体)交叉反应‌。

　　灵敏度‌：检测限通常为0.156-10ng/mL，适用于低浓度样本‌。

　　样本兼容性‌：支持血清、血浆、细胞培养上清等样本类型‌。

　　4. ‌应用场景‌

　　免疫研究‌：评估Th1/Th2细胞平衡及IFN-γ分泌水平‌。

　　疾病模型‌：如哮喘、肿瘤微环境中的IL-12动态监测‌。

　　注意事项

　　样本处理‌：避免反复冻融，尿液样本需离心去除颗粒物‌。

　　干扰因素‌：NaN3会抑制HRP活性，需避免使用含防腐剂的样本‌。

　　注：仅供科研使用，以上资料供参考，如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

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