一、核心原理：双抗体夹心法

　　包被

　　实验开始前，96孔微孔板的孔内壁已经预先包被了一种高度特异性的捕获抗体。这种抗体是针对大鼠胰岛素受体β (ISR-β) 分子上的一个特定抗原表位的。

　　这些抗体牢固地吸附在塑料板表面，用于“捕获"后续步骤中的目标蛋白。

　　加样与结合

　　将您的待测样本(如大鼠的血清、血浆、细胞裂解液或组织匀浆)加入到微孔中。

　　如果样本中含有大鼠ISR-β蛋白，它会被孔板上的捕获抗体特异性地捕捉并固定住。

　　洗涤：洗去所有未被结合的蛋白质和其他杂质。

　　加检测抗体

　　加入另一种检测抗体。这种抗体同样针对大鼠ISR-β分子，但识别的是另一个不同的抗原表位。

　　因此，它能与已被捕获的ISR-β蛋白结合，形成 “捕获抗体-抗原-检测抗体"的“三明治"复合物。

　　再次洗涤：洗去所有未结合的检测抗体。

　　加酶标记物

　　加入一种酶标记的二抗(例如，辣根过氧化物酶-HRP标记的链霉亲和素-Streptavidin，如果检测抗体是生物素-Biotin标记的)。这个二抗会特异性地与检测抗体结合。

　　此时，复合物变为 “捕获抗体-抗原-检测抗体-酶标记二抗" 。

　　第三次洗涤：洗去所有未结合的酶标记物。此时，孔中留下的酶量就与样本中ISR-β的量直接相关。

　　加底物显色

　　加入酶的无色底物(如TMB)。留在孔中的酶(如HRP)会催化底物发生化学反应，生成蓝色的产物。

　　终止与测定

　　加入终止液(通常是稀硫酸)来终止酶促反应。反应液的颜色会由蓝色变为稳定的黄色。

　　立即使用酶标仪在450 nm波长下测量各孔的光密度值(Optical Density, OD值)。

　　二、定量原理：标准曲线

　　颜色的深浅(OD值的高低)与孔中结合的酶量成正比，而酶量又与样本中ISR-β的含量成正比。

　　为了实现精确定量，试剂盒会提供一系列已知浓度的ISR-β标准品。将这些标准品与待测样本在同一块板上同时进行操作。

　　以标准品的浓度为横坐标(X轴)，以其对应的OD值为纵坐标(Y轴)，绘制出一条标准曲线。

　　最后，将待测样本的OD值代入这条标准曲线，即可计算出样本中大鼠ISR-β的精确浓度。

　　原理总结流程图：

　　包被捕获抗体 → 加入样本(ISR-β被捕获) → 洗涤 → 加入检测抗体 → 洗涤 → 加入酶标记二抗 → 洗涤 → 加入底物显色 → 终止反应 → 测定OD值 → 通过标准曲线计算浓度

　　注：以上仅供参考，科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　大鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒实验原理 天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒