大鼠成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-8510 成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)ELISA试剂盒

　　有效期：6个月(4℃避光保存)

　　一、试剂盒组成

　　预包被酶标板：96孔/48孔，包被抗大鼠FGFR1单抗。

　　标准品：6个浓度梯度(0-1000 pg/mL)，冻干粉需复溶。

　　生物素化检测抗体：HRP标记，30倍浓缩液(0.4 mL)。

　　显色系统：TMB底物液(15 mL)、终止液(2M H₂SO₄，15 mL)。

　　辅助试剂：洗涤缓冲液(30×浓缩液)、样本稀释液(含1% BSA)。

　　二、实验流程

　　样本准备

　　血清/血浆：采集后3000×g离心10分钟，避免溶血。

　　组织匀浆：按1:9(w/v)加入PBS匀浆，离心取上清。

　　细胞上清：直接检测或离心去除碎片。

　　保存：短期4℃(≤48小时)，长期-80℃(避免反复冻融)。

　　检测步骤

　　加样：标准品/样本各100μL/孔，37℃孵育90分钟。

　　洗涤：洗涤缓冲液(1:20稀释)洗板3次，拍干。

　　加抗体：生物素化抗体100μL/孔，37℃孵育60分钟。

　　显色：TMB底物液100μL/孔，避光反应15分钟，终止液50μL/孔。

　　读数：450nm波长测OD值，绘制标准曲线计算浓度。

　　三、注意事项

　　交叉反应：本试剂盒特异性针对大鼠FGFR1，与人源FGFR1交叉反应率<5%。

　　灵敏度：检测下限为15 pg/mL，线性范围50-1000 pg/mL。

　　干扰因素：避免高脂或溶血样本，建议稀释后复测。

　　质量控制：每板需设空白孔、标准品复孔，CV值应<10%。

　　四、数据示例

　　标准品浓度 (pg/mL)OD450均值

　　00.05

　　500.32

　　1000.67

　　拟合曲线：建议采用四参数逻辑回归(4PL)模型。

　　五、技术支持

　　问题排查：若OD值异常，检查洗涤步骤或底物避光性。

　　定制服务：可提供大鼠FGFR1重组蛋白(15kDa)作为阳性对照

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

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