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BUNSEN本生大鼠脂褐素(Lipo)ELISA试剂盒
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法检测大鼠血清、血浆或组织匀浆中的脂褐素(Lipo)水平。预包被抗Lipo抗体的微孔板与样本中的Lipo结合后,加入HRP标记的二抗形成复合物,经TMB显色后,450nm波长下测定吸光度,浓度与OD值呈正比。
操作步骤
样本处理
血清/血浆:室温凝固后3000rpm离心10分钟,避免溶血。
组织匀浆:按1:9比例加入PBS,匀浆后离心取上清。
标准品稀释
原倍标准品梯度稀释为80ng/L至2.5ng/L,共5个浓度点。
加样与孵育
每孔加标准品/样本50μl,空白孔加稀释液,37℃孵育60分钟。
显色与检测
洗板后每孔加TMB 100μl,避光反应15分钟,加终止液50μl,酶标仪测OD值。
注意事项
样本保存:-20℃避免反复冻融,NaN3会抑制HRP活性。
洗涤要求:每次浸泡1-2分钟,拍干残留液体以减少背景干扰。
有效期:2-8℃保存6个月,开封后需密封防潮。
数据分析
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制四参数拟合曲线,样本浓度通过曲线方程计算。
典型灵敏度:1.0ng/L,检测范围1.0-40ng/L。
注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 细胞培养耗材 天津本生Elisa试剂盒
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