小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒实验说明书

　　BS-2378小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒

　　实验原理

　　采用双抗体夹心法，通过预包被抗15-LOX单抗捕获样本中的目标蛋白，再与生物素标记的二抗结合形成复合物，经TMB显色后测定450nm吸光度，浓度与OD值呈正相关。

　　试剂盒组成

　　组分48T规格96T规格保存条件

　　预包被酶标板8×6条8×12条2-8℃

　　标准品0.5mL(0-10ng/mL)0.5mL(0-10ng/mL)-20℃

　　生物素化检测抗体60μL(100×)120μL(100×)2-8℃

　　TMB显色液(A/B)各3mL各6mL避光2-8℃

　　20×浓缩洗涤液30mL60mL室温

　　样本处理要求

　　血清/血浆：

　　使用EDTA抗凝管采集，2000-3000rpm离心20分钟，避免溶血。

　　短期保存于2-8℃(≤48小时)，长期需-20℃分装，避免反复冻融。

　　组织匀浆：

　　按1:9比例加入PBS(pH7.4)，机械匀浆后离心取上清。

　　操作步骤

　　标准品梯度稀释：取7支EP管，按1:2比例稀释至0.156-10ng/mL。

　　加样孵育：每孔加入100μL标准品/样本，37℃孵育90分钟。

　　洗涤显色：弃液后加入生物素化抗体，37℃孵育60分钟，TMB避光显色15分钟。

　　终止检测：加入终止液后30分钟内读取450nm吸光度。

　　结果分析

　　标准曲线拟合：推荐四参数逻辑回归(R²>0.99) 。

　　灵敏度：0.156ng/mL，线性范围0.156-10ng/mL。

　　注意事项

　　显色液需避光保存，避免金属离子污染。

　　浓缩洗涤液需用蒸馏水1:20稀释，现配现用。

　　高脂样本需离心去除悬浮物，避免假阳性。

　　注意：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

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