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小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒实验说明书
BS-2383 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒
一、实验原理
采用双抗体夹心ELISA法,通过特异性抗体捕获样本中的α1-AGP,经酶标二抗显色后,通过吸光度值定量检测。
二、试剂盒组成
组分规格保存条件
预包被板条96T/48T2-8℃
标准品(冻干)2支-20℃
酶标抗体1瓶2-8℃避光
显色底物1瓶2-8℃避光
终止液1瓶室温
三、操作步骤
样本处理
血清/血浆:离心后取上清,避免溶血。
细胞上清:离心去除颗粒物,立即检测或-80℃保存。
标准曲线制备
标准品梯度稀释(0-1000 ng/mL),每个浓度设复孔。
加样与孵育
每孔加入100μL标准品/样本,37℃孵育90分钟。
洗涤后加入酶标抗体,37℃孵育60分钟。
显色与终止
加入显色底物避光反应15分钟,终止液终止反应。
检测
450nm波长测定吸光度,绘制标准曲线计算浓度。
四、注意事项
样本要求:避免反复冻融,避免使用高脂或溶血样本。
试剂平衡:使用前需恢复至室温,避免冷凝水影响结果。
交叉污染:枪头需更换,避免孔间污染。
五、性能参数
灵敏度:检测限≤0.5 ng/mL。
回收率:85%-115%。
批间差:CV<10% 。
六、结果计算
采用四参数逻辑曲线拟合,样本浓度=标准曲线对应值×稀释倍数。
七、常见问题
高背景值:可能因洗涤不充分或抗体浓度过高。
线性不佳:检查标准品稀释准确性或孵育时间。
注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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