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小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒实验说明书
发布时间:2025/9/29浏览:34次
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  小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒实验说明书

  BS-2383 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒

  一、实验原理

  采用双抗体夹心ELISA法,通过特异性抗体捕获样本中的α1-AGP,经酶标二抗显色后,通过吸光度值定量检测。

  二、试剂盒组成

  组分规格保存条件

  预包被板条96T/48T2-8℃

  标准品(冻干)2支-20℃

  酶标抗体1瓶2-8℃避光

  显色底物1瓶2-8℃避光

  终止液1瓶室温

  三、操作步骤

  样本处理

  血清/血浆:离心后取上清,避免溶血。

  细胞上清:离心去除颗粒物,立即检测或-80℃保存。

  标准曲线制备

  标准品梯度稀释(0-1000 ng/mL),每个浓度设复孔。

  加样与孵育

  每孔加入100μL标准品/样本,37℃孵育90分钟。

  洗涤后加入酶标抗体,37℃孵育60分钟。

  显色与终止

  加入显色底物避光反应15分钟,终止液终止反应。

  检测

  450nm波长测定吸光度,绘制标准曲线计算浓度。

  四、注意事项

  样本要求:避免反复冻融,避免使用高脂或溶血样本。

  试剂平衡:使用前需恢复至室温,避免冷凝水影响结果。

  交叉污染:枪头需更换,避免孔间污染。

  五、性能参数

  灵敏度:检测限≤0.5 ng/mL。

  回收率:85%-115%。

  批间差:CV<10% 。

  六、结果计算

  采用四参数逻辑曲线拟合,样本浓度=标准曲线对应值×稀释倍数。

  七、常见问题

  高背景值:可能因洗涤不充分或抗体浓度过高。

  线性不佳:检查标准品稀释准确性或孵育时间。

  注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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