BS-2331 小鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法检测小鼠样本中的GR蛋白浓度。将抗GR单抗包被于微孔板，加入样本后形成抗原-抗体复合物，再与HRP标记的二抗结合，最终通过TMB底物显色反应定量分析。

　　二、试剂盒组成

　　组分规格保存条件

　　预包被微孔板96T/48T2-8℃避光

　　GR标准品6浓度梯度-20℃冻存

　　HRP标记检测抗体1瓶2-8℃避光

　　TMB底物液A/B各1瓶2-8℃避光

　　注：不同批号试剂严禁混用

　　三、关键操作步骤

　　样本处理

　　血清/血浆：离心后取上清，避免溶血

　　组织匀浆：按1:9比例加入裂解液，冰上超声破碎

　　标准曲线制备

　　冻干标准品需用200μL标准品稀释液复溶，静置10分钟后上下颠倒混匀15次

　　梯度稀释时每次稀释后需短暂离心，避免气泡产生

　　孵育条件

　　37℃温育90分钟(每步加样后轻拍板边缘混匀)

　　洗涤液需现配现用，每次浸泡时间≤30秒

　　四、结果判定标准

　　有效性验证

　　标准曲线R²≥0.99，最高浓度OD值在2.0-2.4之间

　　复孔变异系数(CV%)应<15%

　　浓度计算

　　样本OD值在标准曲线20%-80%范围内时可直接计算

　　超出范围需重新稀释

　　五、常见问题解决方案

　　现象可能原因处理措施

　　全板不显色漏加HRP酶标抗体检查加样顺序并重做

　　背景值过高洗涤不充分增加洗涤次数至5次

　　标准曲线非线性标准品溶解不均复溶后延长离心时间

　　注意：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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