大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA检测试剂盒技术说明书

　　BS-2901大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒

　　一、产品概述

　　本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)技术，专用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆等样本中第八因子相关抗原(FⅧAg)的浓度。其核心原理为：预包被抗体的微孔板捕获样本中的FⅧAg，再通过酶标记抗体形成复合物，经底物显色后，通过酶标仪测定吸光度(OD值)，浓度与显色强度呈正相关‌。该技术具有高灵敏度(检测限低至0.008 IU/mL)和特异性，适用于科研实验，严禁用于临床诊断‌。

　　二、试剂盒组成

　　预包被微孔板‌：96孔格式，含固定化捕获抗体‌。

　　校准品‌：标准浓度梯度(如80、40、20、10、5、2.5 U/L)，用于绘制标准曲线。

　　对照品‌：阴性对照和阳性对照血浆，验证实验有效性‌。

　　酶标记物‌：辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体‌。

　　底物溶液‌：TMB显色液，反应后呈蓝色，终止后转黄色‌。

　　终止液‌：硫酸溶液，终止酶促反应。

　　样本稀释液‌：用于样本预处理，避免高浓度样本超出检测范围。

　　洗涤缓冲液‌：浓缩液，需按比例稀释使用‌。

　　三、样本处理与保存

　　血清/血浆‌：离心分离(3000×g，10分钟)，避免溶血或脂血;EDTA、肝素或柠檬酸盐抗凝血浆均可使用。

　　组织匀浆‌：生理盐水匀浆后离心取上清。

　　保存条件‌：短期(2-8℃)或长期(-70℃)保存，避免反复冻融;室温解冻后充分混匀。

　　四、操作步骤

　　准备试剂‌：室温平衡试剂20分钟，洗涤缓冲液稀释后使用‌。

　　加样‌：每孔加入50μL样本或校准品，37℃孵育1小时。

　　洗涤‌：弃液后，洗涤缓冲液清洗3次，每次3分钟‌。

　　加酶标记物‌：加入HRP标记抗体，37℃孵育1小时‌。

　　再次洗涤‌：重复洗涤步骤‌。

　　显色‌：加入TMB底物，37℃避光孵育10-30分钟。

　　终止反应‌：加入终止液，溶液由蓝转黄‌。

　　检测‌：酶标仪450nm波长测定OD值，通过标准曲线计算浓度。

　　五、注意事项

　　操作规范‌：严格遵循孵育时间和温度，避免交叉污染‌。

　　样本要求‌：避免溶血或高脂样本，稀释后检测超出范围的样本。

　　试剂保存‌：2-8℃避光保存，有效期6个月;浓缩洗涤液需溶解后使用‌。

　　仪器校准‌：使用高精度加样器(0.5-1000μL)和450nm酶标仪。

　　安全提示‌：仅限科研用途，操作时佩戴防护装备‌。

　　六、性能验证

　　灵敏度‌：检测限低至0.008 IU/mL，可准确识别低浓度样本‌。

　　精密度‌：板内变异系数<10%，板间变异系数<15%，确保结果重现性‌。

　　线性范围‌：标准曲线覆盖2.5-80 U/L，样本稀释后仍保持线性。

　　特异性‌：与结构类似物无交叉反应，避免假阳性‌。

　　七、应用范围

　　本试剂盒适用于大鼠FⅧAg的定量分析，支持疾病机制研究、药物开发等科研场景，提供稳定可靠的检测数据。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

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