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大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA检测试剂盒技术说明书
发布时间:2025/10/27浏览:51次
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  大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA检测试剂盒技术说明书

  BS-2924 大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒

  一、产品概述

  本试剂盒采用双抗体夹心法,用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清等样本中的白三烯B4(LTB4)水平。LTB4是花生四烯酸代谢产物,在炎症反应和免疫调节中起关键作用‌1。

  二、检测原理

  ‌包被抗体‌:微孔板预包抗大鼠LTB4单克隆抗体‌1‌样本孵育‌:样本中的LTB4与包被抗体结合

  ‌酶标抗体‌:加入生物素化的检测抗体形成复合物‌2‌显色反应‌:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,TMB底物显色‌1‌终止反应‌:加入终止液终止反应

  ‌检测‌:450nm波长测定吸光度(OD值),浓度与OD值呈正相关‌1三、试剂盒组成

  组分规格保存条件

  预包被微孔板96孔2-8℃

  标准品(冻干)6管(1000-0pg/mL)-20℃

  样本稀释液15mL室温

  生物素化抗体(100×)120μL-20℃

  酶标复合物12mL2-8℃

  TMB显色液(A/B)各6mL2-8℃避光

  终止液12mL室温

  20×洗涤液60mL室温

  四、样本处理

  ‌血清/血浆样本‌:

  使用EDTA/肝素抗凝管采集

  2000-3000转/分离心20分钟

  避免溶血样本,2-8℃保存≤48小时,长期保存需-20℃‌2‌细胞培养上清‌:

  离心去除细胞碎片

  可直接检测或适当稀释

  五、实验步骤

  ‌试剂准备‌:

  洗涤液:用蒸馏水1:20稀释浓缩液‌2标准品:用样本稀释液配制梯度浓度(1000-0pg/mL)

  酶标抗体工作液:按说明书比例稀释

  ‌操作流程‌:

  加样(100μL/孔) → 37℃孵育90分钟 → 洗涤4次

  加酶标抗体(100μL/孔) → 37℃孵育60分钟 → 洗涤4次

  加TMB显色液(100μL/孔) → 避光显色15-20分钟

  加终止液(50μL/孔) → 10分钟内测定OD值

  六、技术参数

  ‌检测范围‌:62.5-1000pg/mL

  ‌灵敏度‌:≤1.0pg/mL

  ‌精密度‌:批内CV<10%,批间CV<15%

  ‌回收率‌:85%-115%

  ‌特异性‌:与结构类似物无交叉反应

  七、注意事项

  实验前所有试剂需平衡至室温

  以防试剂间交叉污染,使用一次性枪头

  显色反应时间需严格控制,避免过度显色

  酶标仪需提前预热,建议使用双波长(450/630nm)检测

  本产品仅用于科研,不用于临床诊断

  八、储存条件

  未开封试剂盒:2-8℃保存,有效期6个月

  开封后组分:按说明书要求分别保存

  注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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