小鼠白介素22(IL-22)ELISA检测试剂盒技术说明书

　　BS-9441小鼠白介素22(IL-22)ELISA试剂盒

　　一、产品概述

　　本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，专用于小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中IL-22的特异性定量检测。其核心原理为：预包被于微孔板的IL-22单克隆捕获抗体与样本中的IL-22结合，随后加入生物素化检测抗体形成夹心复合物，再通过链霉亲和素-HRP偶联物催化TMB显色，在450nm波长下测定吸光度值与IL-22浓度呈正相关‌。

　　二、技术参数

　　检测范围‌：31.25-2000pg/mL(典型值)‌

　　灵敏度‌：低检出量22.6pg/mL‌

　　特异性‌：与IL-15、IL-20、IL-29等无交叉反应‌

　　重复性‌：板内/板间变异系数<10%‌

　　样本类型‌：血清、血浆、细胞上清液等‌

　　三、试剂盒组成

　　组分 规格 保存条件

　　预包被微孔板 96孔/板 2-8℃(避光)

　　标准品(冻干) 6浓度梯度 -20℃(长期)

　　生物素化抗体 浓缩液(50×) -20℃(长期)

　　HRP-链霉亲和素 浓缩液(50×) -20℃(长期)

　　TMB底物溶液 11mL 2-8℃(避光)

　　终止液(2M H₂SO₄) 6mL 室温

　　20×洗涤缓冲液 50mL 室温

　　四、样本处理规范

　　样本采集

　　血清‌：室温静置10-20分钟，2000-3000g离心20分钟，取上清‌。

　　血浆‌：EDTA抗凝，混合后离心，避免溶血或脂血样本。

　　细胞上清‌：离心去除细胞碎片，建议添加蛋白酶yizhi剂。

　　保存与稀释

　　短期保存‌：4℃(≤1周)。

　　长期保存‌：-20℃(1个月)或-80℃(3个月)，避免反复冻融。

　　稀释方案‌：高浓度样本需用标准品稀释液稀释，推荐梯度稀释(如100倍、1000倍)。

　　五、实验步骤

　　试剂准备‌

　　洗涤液：20×浓缩液用蒸馏水稀释为1×工作液‌。

　　酶结合物：50×浓缩液用稀释液配制为1×工作液‌。

　　加样与孵育‌

　　每孔加入100μL标准品/样本，37℃孵育1小时‌。

　　加入生物素化抗体工作液，37℃孵育1小时‌。

　　洗涤与显色‌

　　洗涤：每孔加入300μL洗涤液，重复3次‌。

　　加入HRP-链霉亲和素工作液，37℃孵育30分钟‌。

　　洗涤：重复5次‌。

　　显色：每孔加入90μL TMB，37℃避光孵育15分钟‌。

　　终止与读数‌

　　加入50μL终止液，450nm波长测定OD值‌。

　　六、结果分析

　　标准曲线‌：以OD值为纵坐标、IL-22浓度为横坐标，拟合四参数逻辑函数曲线‌。

　　样本浓度‌：根据样本OD值在标准曲线上查得浓度，若超出范围需稀释后重测‌。

　　七、注意事项

　　试剂保存‌：未使用试剂盒需4℃(6个月)或-20℃(12个月)保存，避免反复冻融‌。

　　样本质量‌：避免溶血、高血脂或浑浊样本，离心后确保上清澄清。

　　操作规范‌：加样时避免气泡，洗涤需净;显色后需及时终止反应‌。

　　质量控制‌：建议设立复孔以提高准确性，标准曲线需每次实验重新绘制‌。

　　应用范围‌：本试剂盒仅供科研使用。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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