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小鼠硫酸转移酶(SULT)ELISA检测试剂盒技术说明书
发布时间:2025/11/5浏览:57次
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  小鼠(SULT)ELISA检测试剂盒技术说明书

  BS-9421小鼠(SULT)ELISA试剂盒

  一、产品概述

  本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中硫酸转移酶(SULT)的活性水平。‌仅供科研使用‌,不可用于临床诊断。

  二、实验原理

  双抗体夹心法‌:微孔板预包抗小鼠SULT捕获抗体,样本中SULT与其结合后,加入生物素标记的检测抗体形成“抗体-抗原-抗体"复合物。

  酶联显色‌:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,催化底物TMB显色,颜色深浅与SULT浓度呈正相关。

  定量检测‌:酶标仪450nm波长测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样本浓度。

  三、试剂盒组成

  组分 规格(48孔/96孔) 保存条件

  酶标包被板 1×48/1×96 2–8℃

  标准品(80U/L) 0.3ml×6管 2–8℃

  酶标试剂(HRP标记) 5ml/10ml 2–8℃

  显色剂A液 3ml/6ml 2–8℃

  显色剂B液 3ml/6ml 2–8℃

  终止液 3ml/6ml 2–8℃

  浓缩洗涤液(20×) 15ml/25ml 2–8℃

  封板膜、密封袋 2片/1个 室温

  四、样本处理

  血清/血浆‌:

  室温静置10–20分钟,2000–3000转/分离心20分钟,取上清液。

  避免反复冻融,建议分装后-80℃保存。

  组织匀浆‌:

  组织加入生理盐水捣碎,1000×g离心33分钟,取上清液。

  细胞上清液‌:

  1000×g离心32分钟去除颗粒,取澄清液。

  五、实验步骤

  标准品稀释‌:用标准品稀释液将标准品梯度稀释为6个浓度点(80–0 U/L)。

  加样与温育‌:

  每孔加入100μL标准品/样本(建议复孔)。

  37℃避光温育90分钟。

  洗涤‌:弃去孔内液体,用洗涤液浸泡30秒后拍干,重复3次。

  显色与终止‌:

  每孔加入显色剂A/B液各50μL,37℃避光显色15分钟。

  加入终止液50μL终止反应。

  检测‌:酶标仪450nm波长测定OD值,通过标准曲线计算样本浓度。

  六、注意事项

  试剂平衡‌:冷藏试剂需室温平衡15–30分钟后再使用。

  操作规范‌:

  避免气泡产生,加样时贴壁缓慢加入。

  浓缩洗涤液如有结晶,可水浴加热助溶。

  安全防护‌:

  终止液含强酸,需佩戴手套操作。

  实验区域禁止饮食、吸烟。

  质量控制‌:

  每板需设空白孔和标准曲线孔。

  板内/板间变异系数应<10%。

  七、结果计算

  以标准品浓度(U/L)为横坐标,OD值为纵坐标绘制四参数拟合曲线。

  样本浓度=曲线方程OD值代入结果×稀释倍数。

  八、保存与有效期

  未开封试剂盒:2–8℃保存6个月。

  已开封酶标板:密封袋装2–8℃保存≤1个月。

  注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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