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人白介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒技术说明书
BS-0194 人白介素23(IL-23)ELISA试剂盒 本生试剂盒
一、产品概述
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,专用于定量检测人血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的白介素23(IL-23)浓度。 核心组件包括预包被抗体的酶标板、标准品、生物素标记检测抗体及显色底物(TMB),确保高灵敏度(低至0.15 pg/mL)与特异性。 实验全程约3.5小时,适用于科研实验,严禁临床诊断用途。
二、检测原理
抗体结合:IL-23与预包被捕获抗体结合形成复合物。
加入生物素化检测抗体及辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,通过酶促反应显色。
定量分析:TMB底物显色后,终止液终止反应,450 nm波长测吸光度值,IL-23浓度与OD值呈正相关。
三、试剂盒组成
| 组分 | 规格/数量 | 储存条件 |
|-||-|
| 预包被酶标板 | 96孔/板 | 2-8℃避光 |
| 标准品(冻干粉) | 2瓶 | -20℃长期保存 |
| 生物素标记抗体 | 1支(浓缩液) | 2-8℃短期 |
| 显色底物(TMB) | 12 mL | 2-8℃避光 |
| 终止液 | 12 mL | 室温 |
| 20×洗涤液 | 50 mL | 室温 |
注:样本稀释液需按样本类型(血清/血浆/细胞上清)选择专用稀释液。
四、样本处理
血清/血浆:室温凝固30分钟,1000×g离心15分钟,取上清液避免溶血。
细胞上清:直接离心去除细胞碎片,未检测样本需分装后-20℃保存,避免反复冻融。
组织匀浆:按组织重量加入裂解液匀浆后离心取上清。
五、操作步骤
试剂平衡:所有组分室温静置20分钟,浓缩洗涤液水浴溶解结晶。
加样反应:
标准品梯度稀释后加入酶标孔,样本体积25 μL。
依次加入检测抗体、酶标复合物,37℃孵育60分钟。
洗涤显色:洗涤液洗涤3次,加入TMB底物避光反应15分钟,终止液终止。
读数:酶标仪450 nm波长测定OD值,四参数拟合计算浓度。
六、性能参数
检测范围:15.6–1000 pg/mL(线性区间)。
灵敏度:0.15 pg/mL。
精密度:板内/板间变异系数(CV)<10%。
回收率:80%-120%。
七、注意事项
安全防护:操作时穿戴手套、护目镜,避免接触终止液及TMB底物。
试剂保存:未开启试剂盒2-8℃可存6个月,-20℃可存1年;已开启试剂需7日内用完。
实验规范:
不同批次试剂禁止混用。
洗涤时拍干酶标板,避免吸水纸直接接触孔内。
显色反应需避光,终止后30分钟内读数。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。