微生物木质素(Lignin)ELISA检测试剂盒技术说明书

　　BS-5184微生物木质素(Lignin)ELISA试剂盒

　　1. 产品概述

　　本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，专用于定量检测微生物发酵液、细胞裂解液等样本中的木质素含量。木质素是微生物代谢或降解植物细胞壁过程中产生的芳香族聚合物，其含量变化可反映微生物对木质纤维素的利用效率‌。

　　2. 检测原理

　　固相抗体包被微孔板捕获样本中的木质素，再加入酶标记检测抗体形成"抗体-抗原-酶标抗体"复合物。洗涤后加入TMB底物显色，450nm波长下测定吸光度，吸光度值与木质素浓度呈正相关‌。

　　3. 试剂盒组成

　　组分 96孔配置 48孔配置 保存条件

　　微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 2-8℃密封干燥

　　标准品(木质素) 0.5mL×6管 0.5mL×6管 -20℃避光

　　样本稀释液 6mL 3mL 2-8℃

　　酶标抗体-HRP 10mL 5mL 2-8℃避光

　　20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 室温

　　TMB显色液 9mL 4.5mL 2-8℃避光

　　终止液 9mL 4.5mL 室温

　　封板膜 2张 2张 室温

　　4. 样本处理

　　4.1 微生物发酵液

　　8000×g离心10分钟去除菌体

　　取上清液立即检测或-80℃冻存(避免反复冻融)

　　4.2 细胞裂解液

　　超声破碎后12000×g离心15分钟

　　取上清液用PBS稀释10倍后检测

　　4.3 注意事项

　　样本浑浊需0.22μm滤膜过滤

　　避免使用含叠氮钠的样本(抑制HRP活性)

　　5. 实验步骤

　　5.1 试剂准备

　　洗涤缓冲液：蒸馏水稀释20倍至1×工作液

　　标准品梯度：按说明书稀释至0-60μg/mL

　　5.2 加样

　　标准品/样本各50μL加入对应微孔

　　37℃孵育30分钟

　　5.3 洗涤

　　每孔加300μL洗涤液，静置1分钟后拍干

　　重复5次

　　5.4 显色

　　每孔加酶标抗体100μL，37℃孵育30分钟

　　洗涤后加TMB显色液90μL，避光15分钟

　　加终止液50μL终止反应

　　5.5 测定

　　450nm波长测定OD值(参考波长630nm)

　　6. 结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。样本浓度通过曲线方程计算，超出范围需稀释后复测。

　　7. 性能指标

　　参数 指标

　　灵敏度 ≤0.5μg/mL

　　检测范围 1-60μg/mL

　　精密度 批内CV<8%，批间CV<12%

　　回收率 85%-115%

　　8. 注意事项

　　试剂盒使用前需室温平衡30分钟

　　不同批号试剂不可混用

　　终止液含强酸，操作时佩戴防护装备

　　显色液避免接触金属离子

　　微量移液器需校准，避免交叉污染

　　9. 有效期

　　6个月(2-8℃保存)

　　10. 声明

　　本产品仅供科研使用。

　　注：以上仅供参考，本试剂仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　微生物木质素(Lignin)ELISA检测试剂盒技术说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒