小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-2262 小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒

　　一、试剂盒组成

　　固相载体：预先包被小鼠BMPs捕获抗体的96孔微孔板(每孔0.1ml)

　　酶标记物：HRP标记的小鼠BMPs检测抗体(120μl)

　　底物系统：TMB显色液(6ml)+终止液(6ml)

　　标准品：6管冻干标准品(浓度范围156.25-5000 pg/ml)

　　辅助试剂：洗涤缓冲液(20×浓缩液)、样本稀释液、封板膜

　　二、样本处理

　　血清/血浆：

　　室温凝固10-20分钟，3000rpm离心10分钟取上清

　　避免溶血(血浆需EDTA/柠檬酸盐抗凝)

　　细胞上清：

　　3000rpm离心10分钟去除颗粒

　　组织匀浆：

　　生理盐水捣碎后3000rpm离心10分钟

　　保存条件：

　　2-8℃保存≤24小时，长期保存需分装冻存于-20℃

　　三、操作步骤

　　包被：

　　4℃过夜孵育(抗原浓度需优化)

　　洗涤：

　　弃孔内溶液，3次洗涤(每次3分钟)

　　加样：

　　样本/标准品50μl+HRP抗体50μl，37℃孵育1小时

　　显色：

　　TMB底物50μl，37℃避光10-30分钟

　　终止：

　　加终止液50μl，15分钟内测OD值

　　四、结果计算

　　标准曲线：

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线

　　样本浓度：

　　样本OD值代入标准曲线方程，结果乘以稀释倍数

　　定量范围：

　　156.25-5000 pg/ml(灵敏度<10 pg/ml)

　　五、注意事项

　　试剂保存：

　　试剂盒2-8℃保存，有效期6个月

　　洗涤液结晶需水浴溶解后使用

　　操作规范：

　　避免交叉污染(加样枪需校准)

　　终止液含强酸，接触后立即冲洗

　　实验限制：

　　仅用于科研，不得用于临床诊断

　　样本值超范围需重新稀释测定

　　注：供科研使用，以上资料供参考，不作为实验依据，具体请咨询技术老师或品牌商。

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