ELISA实验中洗涤步骤的常见错误有哪些?

　　以下是天津本生对ELISA实验中洗涤步骤的常见错误及对应的解决方案，综合实验关键环节与优化建议：

　　一、洗涤液配置与使用错误

　　缓冲液选择不当‌

　　错误：直接使用纯PBS(不含Tween-20)洗涤，导致非特异性结合残留。

　　解决：需使用含0.05%-0.2% Tween-20的PBST缓冲液，降低表面张力增强洗涤效果。

　　洗液温度过低‌

　　错误：冬季未预热洗液，导致洗涤不(“花板"现象)。

　　解决：洗液温度应维持在20-30℃，避免低温影响去污效果。

　　二、手工操作失误

　　洗涤不净

　　错误：洗液未注满孔或静置时间不足(<1分钟)，残留未结合物质。

　　解决：每孔注满洗液后静置1-2分钟，重复3-5次，拍板时垂直扣干。

　　拍板动作不规范‌

　　错误：左右甩动板子导致孔间交叉污染。

　　解决：垂直扣板于吸水纸上，避免液体飞溅。

　　三、洗板机操作问题

　　参数设置错误‌

　　错误：吸液残留量>2μL或吸头高度不当，导致液体残留。

　　解决：调整吸头距孔底0.5-1mm，每日校准注液量。

　　维护不足‌

　　错误：未定期清洁吸头，造成堵塞或污染。

　　解决：每周用10%次氯酸钠冲洗管路，更换堵塞吸头。

　　四、其他常见错误

　　错误类型‌ ‌后果‌ ‌解决方案‌

　　洗涤次数不足‌ 高背景信号(假阳性) 增加至5-6次，最后一次延长静置时间

　　洗液过期/污染‌ 絮状物堵塞孔底 现配现用，过滤混浊洗液

　　封闭后未充分洗‌ 非特异性吸附增加 封闭后PBST洗涤3次，去除BSA

　　五、本生试剂盒特别提示

　　显色前处理‌：最后一次洗涤后需拍干，避免残留液体稀释底物导致显色异常。

　　边缘效应‌：外圈孔易残留液体，建议弃用或单独处理。

　　通过规范操作可减少80%的洗涤相关误差。若问题持续，建议联系技术支持获取定制化方案。

　　注：以上资料仅供参考，如需更详细说明，可参考具体品牌商附带产品信息。

　　天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。移液器吸头