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垂直电泳槽(双板/四板)操作全解析:从灌胶到转印的避坑手册
更新时间:2025-06-19浏览:28次

  垂直电泳槽(双板/四板)操作全解析:从灌胶到转印的避坑手册

  以下是天津本生 垂直电泳槽(双板/四板)全流程操作解析及避坑指南,综合结构差异与实验优化要点:

  一、‌灌胶阶段关键操作‌

  玻璃板组装‌

  双板槽需手动对齐玻璃板并密封橡胶框,四板槽采用凸轮卡锁制胶框快速对齐;

  玻璃板倾斜20°安装(薄板略高于厚板)可有效防漏胶。

  凝胶配制‌

  分离胶‌:灌胶后覆盖去离子水或无水乙醇压平界面,避免波浪状条带;

  浓缩胶‌:插入梳子后需补胶,防止凝固收缩导致上样孔变形。

  防漏胶技巧‌

  检查橡胶垫老化情况,优先选用高粘性软垫;

  四板槽需确保实验台绝对水平,避免多胶同步漏液。


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  二、‌电泳运行优化‌

  问题‌ ‌原因‌ ‌解决方案‌

  条带扭曲 电场不均或缓冲液陈旧 预电泳5分钟平衡电场,更换新鲜缓冲液

  内槽漏液 密封条老化或玻璃板未压紧 更换密封条,双手斜角位均匀拧紧螺丝

  电泳速度过慢 电压设置过低(双板槽<200V) 四板槽可调至150V同步运行4块胶

  三、‌转印环节避坑要点‌

  膜处理‌

  PVDF膜需甲醇激活30秒,NC膜直接浸润转印缓冲液;

  大蛋白(>100kDa)用0.45μm膜,小蛋白选0.22μm。

  三明治组装‌

  滤纸/膜/胶叠放后需用玻璃棒滚动排气泡;

  四板槽转印时需独立检查每块胶的转印方向。

  参数设置‌

  常规转印条件:100V恒压1小时(需冰浴);

  高分子量蛋白建议降电压至80V延长至2小时。

  四、‌维护与故障处理‌

  电极维护‌:每月用10%醋酸浸泡铂金丝10分钟除盐结晶;

  漏液应急‌:立即断电,用琼脂封堵缝隙后重启;

  冷却系统‌:四板槽优先选集成散热设计,双板槽需外接循环水(15-20℃)。

  通过规范操作与针对性优化,可显著提升垂直电泳的稳定性和重复性。

  根据实验通量、预算及操作复杂度综合选择,可参考厂商提供的兼容性参数(如天津本生双板 BS-mini01 和四板 BS-mini04 )。

  BS-300 基础性电泳仪电源

  BS-600C 通用型电泳仪电源

  BS-mini01 垂直电泳槽(双板)

  BS-mini04 垂直电泳槽(四板)

  BS-ZY03 转印电泳槽(WB双板和铂乐通用)

  BS-ZY04 转印电泳槽 (WB四板)

  BS-sub02 琼脂糖电泳槽

  注:以上资料仅供参考,具体请咨询技术老师。

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