酶标板实验优化：加样、洗涤、读板全流程技巧

　　以下是天津本生对酶标板实验全流程优化的关键技巧，涵盖加样、洗涤和读板三大核心环节：

　　一、加样优化技巧

　　精准加样控制‌

　　使用多道移液器(误差<2%)，单次加样时间控制在10分钟内，避免预孵育时间差异影响重复性

　　高浓度样本需预稀释(如1:20 PBS稀释)，溶血样本应弃用

　　防蒸发处理‌

　　孵育时反应板需加盖密封膜，并置于铺有湿布的密闭盒内保持湿度

　　液体样本4℃保存≤1周，-80℃长期保存需密封防冻干

　　二、洗涤关键参数

　　操作要点 优化方案 注意事项

　　洗涤液配制 Tween-20浓度0.05%-0.1%，含0.5M NaCl 避免使用含叠氮钠的缓冲液(HRP系统)

　　洗涤次数 常规3-5次，高背景样本增至8次 竞争法需控制单次洗涤≤2分钟

　　拍干方式 倒置拍板力度均匀，使用无屑滤纸 垂直猛拍易导致包被物脱落

　　三、读板质量控制

　　显色控制‌

　　底物加入后每10分钟观察显色，强阳性孔需提前终止

　　双波长检测(主450nm/参比630nm)可减少孔间干扰

　　仪器校准‌

　　读板前预热酶标仪，设置温控参数(如37℃±0.5℃)

　　边缘孔数据弃用，仅分析中间60孔保证一致性

　　四、特殊样本处理

　　高脂血样本‌：12000rpm离心10分钟去除脂蛋白

　　组织匀浆‌：添加RIPA裂解液后-80℃保存，避免反复冻融

　　流程衔接提示‌：

　　洗涤后需立即进行下一步操作，酶标板干燥会导致复合物失活

　　自动化洗板机需定期校准吸液高度(距孔底0.5-1mm)

　　注：以上资料仅供参考，如需完整说明，建议联系供应商获取随货文件。

　　天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。