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荧光定量PCR板用磁力架主要应用、类型、选择要点
下面本生技术小编将从它的定义、工作原理、主要应用、类型、选择要点和使用注意事项等方面进行全面介绍。
一、什么是荧光定量PCR板磁力架?
荧光定量PCR板磁力架是一种专门设计用于容纳和固定标准96孔PCR板(或8联管)的装置。其内部嵌有精心排列的强力磁铁(通常是钕铁硼磁铁)。当将含有磁珠-液体混合物的PCR板放置其上时,磁力架能够产生强大的磁场,将磁珠迅速吸附并固定在PCR板孔的侧壁或底部,从而轻松实现液体与磁珠的分离。
它的设计匹配qPCR板的尺寸和孔距,确保了每个孔都能受到均匀且强大的磁场作用。
二、工作原理
其核心原理是磁分离技术:
结合:在qPCR板的每个孔中,含有目标分子(如DNA、RNA、蛋白质)的溶液与表面覆有特定官能团(如羧基、链霉亲和素)的磁珠混合。目标分子会特异性地结合到磁珠上。
吸附:将qPCR板放置到磁力架上。磁场在瞬间穿透板壁,作用于孔内的磁珠。
固定:结合有目标分子的磁珠被磁场吸附到孔壁一侧,形成肉眼可见的磁珠团。
清洗:此时,孔内的液体(含有不需要的杂质、蛋白质、盐离子等)变得清澈且与磁珠分离。用移液器可以轻松地吸弃上清液,而不会扰动磁珠。
洗脱:将板从磁力架上移开,磁场消失。加入洗脱缓冲液(如水或TE缓冲液)并吹打混匀,目标分子从磁珠上释放到溶液中,最终得到纯化的样品。
三、主要应用
qPCR板磁力架主要用于高通量、小体积的磁珠纯化实验,常见于:
二代测序(NGS)文库构建:在文库纯化、大小选择、扩增产物纯化等步骤中。
高通量核酸提取与纯化:从96孔板培养的细胞或组织中快速提取基因组DNA或RNA。
PCR/qPCR产物纯化:去除反应体系中的引物、dNTPs、酶等杂质,提高下游实验效率。
蛋白质纯化与免疫沉淀:如使用磁珠进行高通量的Co-IP、ChIP等实验。
自动化工作站:许多磁力架的设计兼容液体处理机器人,用于实现全自动化的纯化流程。
四、主要类型
根据磁场方向分类:
侧吸式磁力架:磁铁位于孔的侧面,磁珠被吸附到孔的侧壁上。优点是吸附速度快,孔底无磁珠残留,便于吸弃上清。这是目前最主流的类型。
底吸式磁力架:磁铁位于孔的下方,磁珠被吸附到孔底。优点是比较节省空间,但有时孔底中心会残留少量磁珠,吸弃上清时需要特别小心以免触及磁珠。
根据材质分类:
金属材质:通常为铝合金,坚固耐用,散热性好。
工程塑料材质:重量轻,成本较低,耐腐蚀。
根据通量分类:
96孔板标准型:常用。
48孔/深孔板兼容型:有些设计可兼容多种板型。
根据是否兼容自动化:
手动操作型:设计简单,用于人工操作。
自动化兼容型:具有特定的外形尺寸和底座高度,可集成到机械臂工作站中。
五、如何选择合适的qPCR板磁力架?
磁场强度和均匀性:这是最重要的指标。强大的磁场能确保磁珠快速(通常在1分钟内)且地被吸附,提高实验效率和回收率。
吸附方式:侧吸式因其优势已成为大多数实验室的选择。
板位兼容性:确保磁力架能牢固地放置您使用的qPCR板品牌,避免滑动。
耐用性:高质量的磁力架应能长期保持磁性不衰减,且外壳坚固,不易损坏。
人性化设计:是否有取板凹槽、防滑脚垫、标识清晰等。
六、使用注意事项
避免撞击和高温:强力磁铁受到猛烈撞击或长期处于高温环境(>80°C)可能会消磁。
保持清洁:及时清理洒出的液体,防止腐蚀。可用75%乙醇擦拭消毒。
远离敏感物品:强磁场会影响卡、手机、电脑硬盘、机械手表等物品,请妥善存放。
轻柔操作:放置和取下板子时动作轻柔,避免板子弯曲或溅出孔内液体。
注:以上资料仅供参考,不作为实际数据,如需具体产品资料请咨询技术老师或品牌商。
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