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qPCR实验:0.1 ml PCR 12联管配荧光定量光学平盖
这是一种专为实时荧光定量PCR(qPCR)实验设计的关键耗材,其核心目的是在qPCR仪中进行荧光信号采集时,实现高通量、低成本且可靠的检测。
以下是详细的介绍:
一、是什么?
这是一种通常由高透光的聚丙烯(PP)或聚酯薄膜制成的薄片状盖膜。它的一面涂有特殊的光学透明胶,另一面是超平滑的光学表面。
匹配性:它专为12联管(也称为12排管) 设计,尺寸匹配标准96孔板规格(SBS标准)的12联管架子。
功能:通过压敏胶,将其紧密地粘贴在12联管的管口上,形成一个光学平整的密封表面,并防止PCR过程中试剂的蒸发和交叉污染。
二、主要特点与优势
优异的光学透性:
盖膜具有的透光率,特别是在qPCR常用的荧光波长范围内(如FAM, VIC, ROX, Cy5等),确保荧光信号能被仪器光学检测系统准确、高效地捕获,保证数据的精确性。
光学平整表面:
“平盖"意味着其表面非常平整。这在qPCR中至关重要,因为仪器的光学镜头在扫描时,其焦距是固定的。一个平整的盖膜表面确保了每个孔到镜头的距离一致,避免了因高度差导致的信号聚焦不准和信号衰减,从而保证了孔间数据的可比性和重复性。
密封防蒸发:
背面的压敏胶能形成牢固的密封,有效防止PCR过程中高温导致的水分蒸发。试剂蒸发会显著改变反应体系的浓度,导致实验失败(如Ct值不准、反应效率低下等)。
高通量与低成本:
这是其相对于单个硬质穹顶盖。使用硬质盖帽需要逐个手动或使用压盖器扣盖,非常耗时耗力。而光学平盖可以一次性密封整排12个或整个96孔板,极大地提高了工作效率,特别适合大批量样本检测。
成本通常远低于购买96个独立的硬质盖帽。
防交叉污染:
良好的密封性也避免了气溶胶的溢出,防止了孔与孔之间的交叉污染。
三、适用场景
高通量荧光定量PCR实验:如基因表达分析(RT-qPCR)、病原体检测、SNP分型等所有需要用到96孔板格式qPCR的实验。
使用标准12联管(0.1 ml)和96孔板支架的各类qPCR仪,例如:
Applied Biosystems (ABI) 7500/7500 Fast, StepOnePlus, ViiA 7
QuantStudio 3/5/6/7 Pro
Bio-Rad CFX96, CFX Opus系列
Roche LightCycler 480
Eppendorf Mastercycler ep realplex
以及其他兼容96孔板的qPCR仪。
四、如何使用?
准备:将反应体系加入0.1 ml的12联管中,并将联管放入对应的96孔板架子上。
撕取:从保护底纸上取下一张光学平盖(通常为8联排或12联排的预切割盖膜)。
覆盖:将盖膜有胶的一面朝下,仔细对齐管架的上缘,轻轻放下。
压紧:使用提供的压板工具或实验室常用的平板刮板,用力、均匀地刮压盖膜表面,确保每个管口都与盖膜密封,没有气泡和褶皱。
检测:将密封好的整个板架放入qPCR仪中进行扩增和荧光采集。
V20122-C | 0.2ml PCR十二联管 | 透明 | 120排/盒, 10盒/箱 |
V20122-M | 0.2ml PCR十二联管 | 乳白色 | 120排/盒, 10盒/箱 |
V10122-C | 0.1ml PCR十二联管 | 透明 | 120排/盒, 10盒/箱 |
V10122-M | 0.1ml PCR十二联管 | 乳白色 | 120排/盒, 10盒/箱 |
V21112-C | 荧光定量PCR十二联管光学平盖 | 透明 | 120排/包, 10包/盒 |
五、选择注意事项
兼容性:务必确认光学平盖与您实验室的qPCR仪型号兼容。不同仪器的光学系统设计可能对盖子的透光率和厚度有特定要求。
粘合剂:优质的粘合剂应能在PCR热循环的高温(通常最高105°C)下保持粘性,不会熔化、溢出或残留难以清理的胶渍。
无核酸酶/无酶:确保产品经过认证,无核酸酶和无DNA/RNA酶污染,这对于敏感的qPCR实验至关重要。
无荧光干扰:盖膜自身不应产生自发荧光,以免干扰荧光信号的采集,造成背景值过高。
注:以上资料仅供参考,不作为实际数据,如需具体产品资料请咨询技术老师或品牌商。
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