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ELISA试剂盒中的稀释液是实验中的关键辅助试剂,其主要作用包括以下方面:
调整浓度
用于将标准品、抗体或样本稀释至适合检测的浓度范围,确保信号强度在试剂盒的线性检测范围内。例如,标准品稀释液需维持梯度浓度的准确性,而样品稀释液则需降低基质干扰。
维持稳定性
稀释液通常含缓冲体系(如PBS)和稳定剂(如BSA、甘油),可保护抗体或抗原的活性,防止降解或失活。部分稀释液还含防腐剂(如叠氮钠)以延长保存时间。
减少非特异性结合
通过添加封闭蛋白(如BSA或血清),稀释液能降低抗体与样本中非目标位点的结合,从而减少背景信号,提高检测特异性。
优化实验条件
稀释液的pH值和离子强度需与实验体系匹配,避免破坏蛋白质结合反应。例如,ELISA包被液需维持蛋白三维结构以增强结合效率。
常见稀释液类型及用途对比
类型 主要用途 典型成分
标准品稀释液 精确稀释标准品,建立浓度梯度 严格缓冲体系、稳定剂
样品稀释液 降低样本基质效应,适配检测范围 封闭剂(BSA)、表面活性剂
抗体稀释液 保护抗体活性,减少非特异性结合 缓冲液、甘油、防腐剂
使用注意事项
现配现用:部分稀释液(如含酶标记物的工作液)需临时配制,避免活性下降。
梯度稀释:标准品需通过倍比稀释法确保浓度准确性,避免误差累积。
匹配样本类型:血清/血浆样本需用含相同基质的稀释液,细胞上清样本建议用培养基稀释。
注:仅供科研使用,以上资料供参考,如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。
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