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如何避免样本损失?低吸附离心管的核心使用要点
第一部分:如何避免样本损失
样本损失通常由两个因素导致:物理吸附 和 化学降解。低吸附管主要解决前者,但综合策略才能达到最佳效果。
选择正确的耗材(治本之策):
使用低吸附离心管/吸头:这是最直接有效的方法。它们经过特殊处理,能显著减少生物大分子的非特异性吸附。
注意材质:聚丙烯(PP)是标准材质,但表面仍有疏水性。低吸附管通常通过物理或化学修饰使管壁更亲水、更光滑。
优化实验操作:
预先润洗:即使使用低吸附管,对于极其珍贵或低浓度的样本,用与样本缓冲液相似的溶液快速润洗一下管壁和吸头,可以饱和潜在的吸附位点。注意:对于蛋白样本,常用0.1% BSA溶液润洗,但需确认BSA不会干扰后续实验。
减少转移步骤:每一步液体转移都会带来损失。尽量减少样本在不同容器间的转移次数,整合实验步骤。
精准操作:使用量程合适的移液器和吸头,确保吸打和排液,避免液体残留。对于微量样本,可采用反向移液法以提高精度。
注意样本特性与保存:
分装保存:避免反复冻融。将样本分装成小份,每次只取用一份,最大限度减少降解和管壁吸附的总机会。
添加保护剂:根据样本类型添加合适的保护剂。例如,在核酸样本中加入EDTA抑制核酸酶,在蛋白样本中加入蛋白酶抑制剂 cocktail。
使用合适的缓冲液:含有少量去垢剂或载体蛋白的缓冲液可以竞争性地结合管壁,减少目标分子的吸附。同样,需确认这些添加剂不影响后续实验。
第二部分:低吸附离心管的核心使用要点
低吸附管是工具,正确使用才能发挥其最大价值。
认清标识,选择正品:
认准包装和管身上的 “Low-Bind"、“Non-Stick" 等标识。
选择信誉良好的品牌供应商,避免使用伪劣产品。劣质管可能不仅无效,还会引入杂质(如RNase)。
区分应用,按需选择:
核酸应用:尤其是微量DNA、PCR产物、小片段核酸或珍贵文库,应使用低吸附管。它们能有效防止核酸吸附,保证浓度和产量的准确性。
蛋白应用:对低浓度蛋白、酶、抗体、多肽等至关重要。吸附会导致活性丧失、定量不准和信号减弱。
常规应用:对于细菌培养、大量样本储存、离心沉淀等操作,标准离心管已足够,无需浪费低吸附管。
正确标记:
低吸附管的表面通常也更疏水,普通记号笔可能难以书写或容易脱落。
建议使用专用的实验室标记笔或打印的标签。
存储注意:
按照说明书要求,存放在干燥、避光、常温的环境中。避免温度或湿度影响其性能。
遵循以上要点,您可以最大限度地减少实验过程中的样本损失,确保实验结果的准确性和可重复性。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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