ELISA试验假阳性的原因及解决方案

　　一、假阳性常见原因

　　操作因素‌

　　加样误差(如枪头触碰孔壁或产生气泡)或洗涤不充分导致非特异性吸附‌。

　　试剂污染或保存不当(如TMB显色剂避光失效)‌。

　　样本因素‌

　　溶血样本释放过氧化物酶活性物质，或细菌污染产生内源性HRP‌。

　　高浓度类风湿因子或自身抗体干扰(如系统性红斑狼疮患者)‌。

　　方法学因素‌

　　钩状效应：样本中待测物浓度过高导致信号抑制‌。

　　试剂盒特异性不足(如不同厂家抗体交叉反应)‌。

　　二、解决方案与优化措施

　　操作优化‌

　　加样规范‌：悬垂加样至孔底，避免气泡或划伤孔壁‌。

　　洗涤：使用去离子水配制洗涤液，每次浸泡1-2分钟，拍干力度均匀‌。

　　试剂管理‌：显色剂现配现用，避免反复冻融‌。

　　样本处理‌

　　溶血样本离心去除血红蛋白，或使用吸附剂去除干扰物质‌。

　　高浓度样本稀释后复测，排除钩状效应‌。

　　方法改进‌

　　选择高特异性试剂盒(如阻断法优于竞争法)‌。

　　增设阴性/空白对照，校正非特异性信号‌。

　　复检确认‌

　　初筛阳性样本需更换方法(如化学发光法或Western Blot)验证‌。

　　临床样本结合病史(如疫苗接种史、自身免疫病)综合判断‌。

　　三、扩展工具与流程

　　质量控制工具‌：使用Curve Expert 1.3优化标准曲线拟合‌。

　　假阳性排除流程‌：

　　重复实验确认结果;

　　检查试剂有效期及储存条件;

　　样本预处理(如离心、稀释);

　　更换检测方法或试剂盒复测‌。

　　四、注意事项

　　老年人群或妊娠期女性假阳性率较高，需结合临床评估‌。

　　实验室需定期校准设备，避免环境因素(如温度波动)影响结果‌。

　　注：仅供科研使用，以上资料供参考，如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

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