0.1mL 96孔PCR板使用指南

　　1. ‌耗材选择与适配性‌

　　材质与规格‌：选择聚丙烯(PP)材质、0.1mL容积的96孔板，确保与荧光定量PCR仪(如ABI 7500fast、Roche 480等)的加热模块匹配‌。

　　颜色与裙边‌：

　　透明板适用于底部光源仪器，乳白色板(如伯乐CFX系列)适合顶部荧光采集‌。

　　根据仪器需求选择无裙边、半裙边或全裙边设计，避免因边缘凸起导致加热不均‌。

　　2. ‌实验前准备‌

　　环境控制‌：在超净台或生物安全柜中操作，紫外线消毒30分钟以上，使用无核酸酶枪头/离心管‌。

　　样本布局‌：优先使用中间60孔(弃用边缘孔)，纵向排列样本以减少热盖压力不均影响‌。

　　3. ‌加样与密封‌

　　加样技巧‌：

　　每孔反应体系10-20μL，采用反向移液法(高粘度样本)或正向移液法(常规样本)，误差控制在±1%内‌。

　　加样后瞬时离心(1000rpm×10s)消除气泡‌。

　　密封方法‌：使用光学膜密封，先纵向压膜，再横向按压边缘，确保无漏液‌。

　　4. ‌上机与扩增‌

　　仪器设置‌：确认温度、循环数、荧光采集参数与试剂盒说明书一致，注意是否需ROX参比染料‌。

　　耗材检查‌：避免使用普通PCR耗材(透光性差)或错误规格的板(如0.2mL板用于0.1mL模块)，防止热传导不均或假阴性‌。

　　5. ‌常见问题与解决‌

　　扩增异常‌：若曲线异常，检查耗材质量(如封膜变形导致光学扭曲)、试剂有效期及冻融次数‌。

　　蒸发控制‌：密封不严会导致ROX荧光上抬，需确保封膜紧密‌。

　　6. ‌注意事项‌

　　一次性使用‌：PCR板不可重复使用或剪开，避免交叉污染和实验误差‌。

　　存储条件‌：未开封试剂盒建议2-8℃保存，部分组分需-20℃避光‌。

　　注：以上仅供参考，科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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