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避免常见误区:ELISA标准化操作步骤
核心原则: 精密、洁净、同步、规范。
一、实验前准备
目标: 确保所有试剂、设备及环境就绪,避免实验中断。
步骤 标准化操作 常见误区与避免方法
避免: 将仪器预热和检查作为标准流程。
二、实验操作流程
阶段一:加样与孵育
步骤 标准化操作 常见误区与避免方法
阶段二:洗涤 - 【最关键的步骤】
步骤 标准化操作 常见误区与避免方法
阶段三:显色与终止
步骤 标准化操作 常见误区与避免方法
避免: 终止顺序必须与显色加样顺序一致!加入终止液后,轻叩板架边缘混匀,避免产生气泡。
阶段四:读数与分析
步骤 标准化操作 常见误区与避免方法
2. 以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准曲线。
3. 根据曲线方程计算样本浓度。 误区: 直接使用线性回归而不用更拟合的曲线(如四参数逻辑曲线);对超出标准曲线范围的样本值不做标注。
避免: 选择R²接近1的拟合方式;对超出范围的样本,应稀释后重测,结果注明稀释倍数。
总结: 成功的ELISA实验源于对细节的致把控。牢记以上常见误区,并将其转化为规范的操作习惯,是获得可靠、可重复数据的关键。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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