如何正确使用ELISA板进行实验?

　　以下是ELISA板正确使用的实验指南，本生结合关键操作要点和常见问题解决方案：

　　一、实验前准备

　　板选择与处理‌

　　优先选用聚苯乙烯材质96孔板(吸附性能均衡)，新板需用去离子水冲洗去除杂质‌

　　包前用碳酸盐缓冲液(pH 9.6)平衡，避免温差导致板变形

　　试剂配制‌

　　标准品需现配现用，冻存样本避免反复冻融(建议分装保存)

　　封闭液推荐5% BSA-PBST(含0.05%吐温20)，37℃预温30分钟

　　二、核心操作步骤

　　包被与封闭‌

　　抗原/抗体包被浓度1-10 μg/mL，100μL/孔，4℃过夜或37℃ 2小时‌

　　封闭液需覆盖孔底，37℃孵育1小时，拍干时避免残留液体

　　加样与孵育‌

　　样本与标准品同步加样，避免边缘效应(边缘孔可加PBS缓冲)

　　37℃孵育时用保鲜膜封板，每10分钟轻震混匀一次

　　三、关键质控点

　　洗涤规范‌

　　手工洗板需拍干后立即加洗涤液，机器洗板需检查针头通畅性

　　洗涤次数3-5次，最后一次拍干后30秒内加下一试剂

　　显色控制‌

　　TMB避光孵育时间需预实验确定(通常10-20分钟)

　　终止液加入后15分钟内读数，双波长检测(450/630nm)

　　四、常见问题处理

　　高背景‌：增加洗涤次数至5次，或更换封闭液为5%脱脂奶粉‌

　　板间差异‌：同一实验使用同一批次板，加样时使用多通道移液器

　　注：具体参数需根据试剂盒说明书调整，建议每板设置阴阳性对照及标准曲线(R²>0.99)。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴!